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ATCC細胞關(guān)于無限細胞系一些應(yīng)用限制解讀

發(fā)布時間: 2022-08-24  點擊次數(shù): 1346次
   ATCC細胞在收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮荆瑢吮炯皶r分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,避免反復(fù)凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。
  科研常用細胞直接從組織上分離的原代細胞和購買的細胞系,通常將從組織上分離獲得的一代到十代內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞,而大部分原代細胞會在此之后逐漸生長停滯并衰老死亡,極少量能繼續(xù)存活至五十代以后的細胞遺傳信息發(fā)生了改變,成為無限細胞系或連續(xù)細胞系,一般的無限細胞系只具有永生性的特點,還有一些細胞的接觸抑制消失,可以多層生長,甚至在異體接種后還有致瘤性。
  無限細胞系由于其永生和快速分裂的特點一直是細胞水平研究時的熱門選擇,由于方便培養(yǎng)、種類繁多、生長速度快且成本較低,可以快速開展研究,使得各種無限細胞系被廣泛應(yīng)用。然無限細胞系“渾身是寶”,但在應(yīng)用上還是有一些限制:
  1.細胞的生物學(xué)特性改變
  在研究過程中由于需要大量的樣本,無限細胞系需要快速繁殖并擴大培養(yǎng),而其在連續(xù)傳代培養(yǎng)過程中會發(fā)生一定突變,無限制地連續(xù)傳代可能導(dǎo)致細胞系的基因型和表型都發(fā)生改變,從而影響實驗結(jié)果。
  2.細胞系交叉污染
  這里說的交叉污染是細胞系之間的交叉污染,就是做實驗用的細胞系內(nèi)可能混進了其他種類的細胞。這可能是由于建立細胞系時導(dǎo)致的,也有可能是一些不當操作如同期多種細胞共養(yǎng)、耗材重復(fù)使用等,或者是由于一些細胞培養(yǎng)相關(guān)產(chǎn)品導(dǎo)致的,可能很不經(jīng)意的一個操作便導(dǎo)致了整個實驗的失敗。
  3.細胞應(yīng)用
  很多細胞在體內(nèi)體外培養(yǎng)中無法增殖,比如在使用神經(jīng)元、骨骼肌細胞、心肌細胞、周細胞以及終末分化的肝細胞等進行實驗時,每次都需要再次從新鮮的組織中分離原代細胞。

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